做體外診斷試劑臨床試驗，大家經(jīng)常會問：說明書里“特異性”那一項列了好多可能的干擾物質(zhì)，做臨床時是不是每一種都得找對應(yīng)的病人樣本測一遍？要是有些干擾物質(zhì)特別少見，病人不好找，能不能在實驗室（臨床前研究）里驗證過關(guān)了，臨床就不管它了？這個問題關(guān)系到臨床試驗怎么設(shè)計，工作量有多大，也關(guān)系到產(chǎn)品能不能順利獲批。咱們就詳細說說這事兒，看看法規(guī)和實際操作是怎么要求的。

干擾樣本入組的要求

1.臨床必須納入干擾樣本嗎？答案是肯定的。 法規(guī)有明確要求?！扼w外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》說了，選病人進組的時候，得把那些可能影響檢測結(jié)果的干擾樣本考慮進去。為啥呢？因為病人樣本里啥成分都有，特別復(fù)雜。干擾物質(zhì)的表現(xiàn)直接關(guān)系到你這試劑測的準不準，這是評價產(chǎn)品性能的關(guān)鍵一環(huán)。

2.納入哪些干擾樣本？重點在“常見”和“預(yù)期”。核心是覆蓋那些臨床上預(yù)期會碰到的、常見的干擾物質(zhì)。像大家熟知的膽紅素（黃疸）、血紅蛋白（溶血）、甘油三酯（乳糜血）這些，基本跑不掉，臨床樣本里經(jīng)常能碰到。國家藥監(jiān)局器審中心發(fā)布的指導(dǎo)原則也建議，優(yōu)先考慮臨床樣本里最高濃度（也就是最差情況）的干擾物來做。簡單說，病人身上容易出現(xiàn)的、濃度可能很高的干擾，臨床得測。

3.“特異性”指標(biāo)下的干擾物質(zhì)都要覆蓋嗎？不一定強制。 這里就是問題的關(guān)鍵了。說明書“特異性”性能指標(biāo)項下，廠家可能會列出一大堆潛在干擾物質(zhì)，包括一些不太常見的或者理論上存在的。臨床試驗的重點在于驗證產(chǎn)品在真實使用環(huán)境下的性能，特別是針對預(yù)期用途和預(yù)期樣本類型中的干擾。所以，并不強制要求臨床試驗必須覆蓋“特異性”項下羅列的每一個干擾物質(zhì)。證據(jù)也指出，具體要納入哪些干擾、納入多少，并沒有一個死板的統(tǒng)一標(biāo)準。臨床入組更關(guān)注那些預(yù)期會遇到、可能顯著影響結(jié)果判斷的常見干擾物質(zhì)。一些非常見或者理論上存在的干擾物，其驗證責(zé)任主要在臨床前研究。

不常見干擾物質(zhì)的處理

1.臨床前研究是主戰(zhàn)場。對于說明書“特異性”項下那些不常見的、或者預(yù)期在常規(guī)臨床樣本中不太可能達到干擾濃度的物質(zhì)，主要的驗證工作是在臨床前研究（分析性能評估）階段完成的。這符合邏輯，因為臨床主要模擬真實使用環(huán)境，驗證整體有效性；而分析性能評估則是在受控條件下，深入考察試劑對各種分析干擾因素的抵抗能力。

2.臨床前怎么驗證？方法很關(guān)鍵。

（1）配對比對是黃金法則：基本方法就是做配對比對。拿一份基礎(chǔ)樣本，一份往里面加高濃度的可疑干擾物（模擬最差情況），然后用你的試劑去測，看看結(jié)果有沒有明顯差別。

（2）樣本濃度有講究：不能只測一個濃度點。得用至少兩個濃度的樣本來測，特別要包含接近臨界值（Cut-off值）的弱陽性樣本，這很關(guān)鍵。比如測某個病，臨界值是10，那就得測濃度在10左右的樣本加了干擾物后會不會受影響。

（3）干擾物濃度要夠高：加的干擾物濃度，得是臨床上可能遇到的最高濃度，這樣才能模擬最壞情況。

（4）設(shè)定好“及格線”：得事先定好標(biāo)準，結(jié)果差多少算有干擾，差多少算沒干擾。這叫“可接受標(biāo)準”或者“驗收標(biāo)準”。如果加了干擾物，結(jié)果變化超過了你的“及格線”，或者可能影響醫(yī)生判斷病情，那就得承認這東西確實干擾了，還得研究干擾的程度跟濃度有啥關(guān)系。如果變化在“及格線”內(nèi)，不影響看病，那就可以說在這個濃度下，這東西不干擾，并說明不干擾的最高濃度是多少。

（5）可以用人工樣本：對于實在找不到天然樣本的罕見干擾物，法規(guī)允許用人工添加的方法來做研究。但要注意，如果干擾物本身跟你測的樣本基質(zhì)（比如血清、尿液）不一樣，添加量最好別超過總體積的5%，并且盡量用接近人體內(nèi)存在的形式（比如藥品用它的代謝物形式）。

3.臨床試驗中對不常見干擾物質(zhì)的要求？可以不做硬性要求。 基于以上，對于經(jīng)過充分、科學(xué)的臨床前研究（分析性能評估）驗證，明確證實其在預(yù)期濃度下不會對檢測結(jié)果產(chǎn)生臨床顯著性影響的“不常見干擾物質(zhì)”，在臨床試驗中可以不做專門要求，即不需要在臨床試驗中刻意去尋找含有這類物質(zhì)的罕見樣本進行入組。 臨床前研究的數(shù)據(jù)足以支持其安全性有效性。當(dāng)然，如果在臨床試驗過程中偶然收集到了含有這類物質(zhì)的樣本，那分析這些樣本的結(jié)果自然也是有價值的補充。

注冊資料注意事項

1.臨床前研究數(shù)據(jù)是核心支撐。既然不常見干擾物質(zhì)主要靠臨床前研究來驗證，那在注冊申報時，分析性能評估報告里關(guān)于干擾試驗（分析特異性）的部分就非常重要了。這部分報告得詳細說明：你研究了哪些干擾物？為什么選它們？用了什么方法（配對比對）？樣本怎么準備的（濃度、基質(zhì)）？設(shè)定的“及格線”（可接受標(biāo)準）是什么？有什么依據(jù)？最終結(jié)果怎么樣？對不干擾的，最高濃度是多少？對有干擾的，干擾程度和濃度啥關(guān)系？ 數(shù)據(jù)要扎實，方法要科學(xué)。

2.臨床試驗方案和報告要體現(xiàn)對常見干擾的考慮。在臨床試驗方案里，要寫明打算怎么納入常見的干擾樣本（比如計劃入組多少溶血、黃疸、高脂血的樣本）。在臨床試驗報告里，要把實際入組的干擾樣本情況（類型、數(shù)量）以及在這些樣本上的檢測結(jié)果分析清楚，證明你的試劑在真實臨床樣本中面對常見干擾是可靠的。

3.引用法規(guī)和指導(dǎo)原則要準確。寫注冊資料時，涉及干擾試驗的要求，主要參考國家藥監(jiān)局發(fā)布的《定性檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則》、《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》等文件。免臨床的情況則要符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》的相關(guān)條款。

最后總結(jié)一下：

1.臨床試驗必須納入樣本：做臨床試驗，一定得想辦法把預(yù)期會遇到的、常見的干擾樣本（像溶血、黃疸、高脂血這些）納入進去測試。

2.“特異性”指標(biāo)不全靠臨床：不強制要求臨床試驗必須覆蓋說明書“特異性”性能指標(biāo)項下羅列的每一個干擾物質(zhì)。臨床的核心是驗證真實使用場景下的性能。

3.不常見干擾靠臨床前驗證：對于說明書“特異性”項下那些不常見的、預(yù)期在常規(guī)樣本中濃度低或碰不到的干擾物質(zhì)，其驗證工作主要在 臨床前研究（分析性能評估） 階段完成。要用科學(xué)的方法（主要是配對比對，用接近臨床最高濃度的干擾物，至少測兩個分析物濃度點包括弱陽性，設(shè)定合理接受標(biāo)準）來證明它們的影響。

4.臨床對驗證過的不常見干擾可放松：經(jīng)過充分且科學(xué)的臨床前研究驗證，明確證實不會產(chǎn)生臨床顯著性影響的不常見干擾物質(zhì)，在臨床試驗中可以不做專門要求去刻意尋找這類樣本入組。臨床前數(shù)據(jù)足夠支持了。

5.注冊資料要清楚呈現(xiàn)：交注冊資料時，臨床前研究的干擾試驗數(shù)據(jù)要詳實、方法要合規(guī)；臨床試驗部分要體現(xiàn)對常見干擾樣本的納入和結(jié)果分析。法規(guī)指導(dǎo)原則要用對。

總的來說，體外診斷試劑干擾樣本的處理，講究個“抓大放小”。臨床重點抓常見干擾的實戰(zhàn)檢驗；不常見干擾的理論風(fēng)險，靠嚴謹?shù)膶嶒炇已芯縼砼懦?。兩者結(jié)合，才能既滿足法規(guī)要求，又保證產(chǎn)品性能可靠，還能合理控制研發(fā)和臨床的成本與周期。思途CRO在協(xié)助客戶處理這類問題時，也特別注重依據(jù)法規(guī)和指導(dǎo)原則，制定科學(xué)高效的驗證策略。